Kiểm nghiệm Virio Cholerae và Virio Parahaemolyticus

Kiểm nghiệm Virio Cholerae và Virio Parahaemolyticus

(Tham chiếu theo sổ tay phân tích vi sinh FDA , ấn bản lần 8, năm 1995)

1. Nguyên tắc

– Virio Cholerae và Virio parahaemolyticus được nuôi ủ trong môi trường lỏng chọn lọc. từ đây dịch khuẩn được cấy chuyền sang môi trường rắn chọn lọc những khuẩn lạc giống Virio Cholerae và Virio parahaemolyticus được thử nghiệm bằng các phản ứng sinh hóa.

2. Môi trường và thiết bị

– Thạch Thiosulphate citrate Bile salt sucrose (TCBS agar)

– Peptone kiềm chứa 1% NaCl (APW)

– TSA + 1 ,5 %NaCl

– Tủ ấm 37±1⁰C

3. Quy trình

• Tăng sinh: Cân vô trùng 25 g mẫu thuỷ sản vào một túi PE đã vô trùng. Cắt các mẫu lớn thành các mảnh nhỏ rồi thêm 225 ml nước pepton kiềm APW. Dập mẫu 2 phút, ủ ở 37±1⁰C trong 6 giờ và 16-24 giờ
• Phân lập và đọc kết quả: từ môi trường tăng sinh cấy ria vào môi trường TCBS thạch ủ ở 37,0 ± 1,0⁰C trong 18 – 24 giờ.
• Trên môi trường TCBS thạch khuẩn lạc V. cholerae tròn, lớn có đường kính 2-3mm hơi dẹt, màu vàng (do vi khuẩn lên men sacaroza), ở giữa đậm và có viền mờ xung quanh. parahaemolyticustròn, lớn có đường kính 3-4mm , màu xanh dương

4. Thử nghiệm sinh hóa

– Khuẩn lạc nghi ngờ trên TCBS thạch để cấy chuyển sang môi trường không chọn lọc TSA 1,5% NaCl. ủ ở nhiệt độ 37,0± 1,0⁰C trong 18 – 24 giờ

+ Thử nghiệm sơ bộ:

5. Báo kết quả

Phát hiện hay không phát hiện.